【産品簡介】

KemiGel無血清3D細胞/類器(qì)官凍存液是一種無血清細胞凍存液，通(tōng)用于各種動物細胞株（腫瘤細胞和(hé)常規細胞），凍存細胞可(kě)在-80℃長期保存（>5年）。配方成分明(míng)确，不含動物來(lái)源性蛋白，不含血清，可(kě)減少(shǎo)各類細菌、病毒和(hé)支原體(tǐ)等污染，保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養成分，提高(gāo)細胞存活率和(hé)活力，亦适合于無血清培養細胞和(hé)蛋白表達細胞。

【産品特點】

1、即用型細胞凍存液

2、直接凍存于-80℃冰箱，長期保存（>5年），不需要程序性降溫

3、高(gāo)安全性，病毒、病菌和(hé)支原體(tǐ)等污染可(kě)能性低(dī)

4、細胞存活率和(hé)活力高(gāo)，批次性差異小(xiǎo)

【使用方法】

（一）3D細胞/類器(qì)官凍存

1、棄置孔中原有(yǒu)的培養基，用PBS清洗每孔2-3次，加入500μl KemiGel基質膠消化液。用1 ml的槍頭吹打溶解KemiGel，将類器(qì)官懸液轉移到15 ml的離心管中，并用500μl KemiGel基質膠消化液收集孔內(nèi)殘餘的類器(qì)官。

2、然後加入4ml消化液，37℃孵育5-10min後，用移液槍反複吹打類器(qì)官（30次），在顯微鏡下檢查類器(qì)官碎片大(dà)小(xiǎo)。加入5 ml PBS終止消化，300 g 離心5min，棄上(shàng)清。

3、加入12 ml基礎培養基重複清洗一次，300 g離心5min。

4、用适量的KemiGel 3D細胞/類器(qì)官凍存液重懸類器(qì)官，然後将類器(qì)官懸液轉入凍存管并放入細胞凍存盒，每支500~1000 μl，通(tōng)常包含2~3個(gè)孔的類器(qì)官（注：每1ml凍存液推薦凍存 1x103-1x107 個(gè)細胞或對應細胞量的類器(qì)官）。凍存盒-80℃冰箱存貯過夜，第二天轉入液氮罐長期存放。

（二）類器(qì)官複蘇

1、準備15 ml離心管，加入10 ml的基礎培養基。

2、從液氮取出凍存的類器(qì)官，37℃水(shuǐ)浴快速解凍，用1 ml的槍頭輕輕吹打混勻類器(qì)官懸液，逐滴緩慢加入準備好的基礎培養基中。

3、300 g離心3 min沉澱類器(qì)官，棄上(shàng)清。

4、加入适量的增強系統（Enhancer）重懸類器(qì)官，再加入等體(tǐ)積KemiGel基質膠混勻，将Enhancer-膠-細胞懸液加入的24孔闆中，每個(gè)孔300 μl。然後将24孔闆小(xiǎo)心放入37℃的細胞培養箱中孵育5-10min後，KemiGell即固化形成水(shuǐ)凝膠狀态，此時(shí)即可(kě)加入類器(qì)官培養基（24孔推薦每個(gè)孔300μl-500 μl），将孔闆置于5% CO2的細胞培養箱37℃孵育培養。

【注意事項】

1. 盡量減少(shǎo)反複凍融的次數(shù)，以免失效；

2. 在凍存細胞分裝後，應減少(shǎo)在外存放時(shí)間(jiān)，盡快移入到-80℃超低(dī)   溫冰箱；

3. 對于幹細胞（ES細胞）等凍存時(shí)，我們建議用戶在使用前，事先 對所凍存的胞進行(xíng)至少(shǎo)為(wèi)期1周的該産品試驗性細胞冷凍保存培養，确認性能後再進行(xíng)正式凍存；

4. 産品含有(yǒu)10% DMSO，部分對DMSO敏感的細胞，建議對其進行(xíng)至少(shǎo)1周的本産品試驗性的細胞凍存培養，确認性能後再正式凍存；

5. 為(wèi)了您的安全和(hé)健康，請(qǐng)穿實驗服并戴一次性手套操作(zuò)。

【儲存】4℃

【有(yǒu)效期】24個(gè)月

【生(shēng)産日期】見包裝盒