産品介紹

KmBlot Rapid Transfer Buffer（KmBlot 快速轉膜液）是一種高(gāo)達 20 倍濃度的高(gāo)效轉膜液，用于 Western Blot 濕轉法轉膜，能高(gāo)效快速地将蛋白轉移到印迹膜（PVDF或硝纖膜）上(shàng)。不使用甲醇，能在 15-30 分鍾內(nèi)完成轉膜過程。

操作(zuò)步驟

1 1×快速轉膜液的配制(zhì)（1000 ml）：取 50 ml 快速轉膜液（20×）倒入燒杯中，加入 850 ml 去離子水(shuǐ)攪拌至完全溶解，然後加入 100 ml 無水(shuǐ)乙醇混勻。

2 做(zuò)好轉印三明(míng)治結構，然後轉移至電(diàn)泳槽中，設定恒流400 mA，電(diàn)泳時(shí)間(jiān)25-30分鍾完成蛋白轉膜。

注意事項

1. PVDF 膜使用前要用無水(shuǐ)甲醇潤濕 30 秒(miǎo)以上(shàng)。

2. 轉印電(diàn)流建議設定恒流 400 mA，一般 25-30 分鍾可(kě)以将 150 kD 以下蛋白完全轉印；小(xiǎo)于 100 kD 蛋白 20 分鍾即可(kě)完全轉印；對于大(dà)于 150 kD 蛋白，建議延長 5-10 分鍾。

3. 凝膠的濃度影(yǐng)響轉印的效率，對于膠濃度 7.5%，20 分鍾即可(kě)完成轉印；對于膠濃度 10%，25-30 分鍾即可(kě)完成轉印；對于膠濃度大(dà)于 10%，建議延長 5-10 分鍾。

4. 40 分鍾時(shí)間(jiān)內(nèi)轉膜不需要放冰上(shàng)，轉膜槽內(nèi)外都不可(kě)放冰預冷，否則會(huì)影(yǐng)響效率。