包 裝 量：
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目錄編号
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包裝單位
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RE127-01
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250次
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RE127-02
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1000次
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産品組成、儲存、濃度：-20℃ 保存1年。濃度： 1U/μl
制(zhì)品說明(míng)：
DNase I，即Deoxyribonuclease I，中文名稱為(wèi)脫氧核糖核酸酶I，是一種可(kě)以消化單鏈或雙鏈DNA産生(shēng)單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸的核酸內(nèi)切酶。DNase I水(shuǐ)解單鏈或雙鏈DNA後的産物，5'端為(wèi)磷酸基團，3'端為(wèi)羟基。DNase I活性依賴于鈣離子，并能被鎂離子或二價錳離子激活。鎂離子存在條件下，DNase I可(kě)随機剪切雙鏈DNA的任意位點；二價錳離子存在條件下，DNase I可(kě)在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個(gè)核苷酸突出的粘末端。
産品特點：
本産品使用本公司特有(yǒu)的DNase和(hé)獨特的反應液消化後不需要繁瑣的苯酚/氯仿抽提滅活；也不需要在加熱滅活前加入EDTA，避免了在RNA中引入EDTA抑制(zhì)下遊的反轉錄反應，使用起來(lái)非常快速，方便。
活性單位：37℃10分鍾內(nèi)，将能夠完全降解1μg pBR322質粒DNA所需的酶量定義為(wèi)1個(gè)活性單位。
來(lái)源：大(dà)腸杆菌表達的31kd重組蛋白 。
酶貯存緩沖液：50 mM Tris-HCl (pH7.5)，10 mM CaCl2，50% (v/v)glycerol。
10×反應緩沖液：100 mM Tris-HCl (pH7.5 at 25℃)，25 mM MgCl2，1 mM CaCl2。
純度：不含其它DNA內(nèi)切酶和(hé)外切酶，不含RNA酶。
适用範圍：
制(zhì)備不含DNA的RNA樣品； RT-PCR反應前RNA樣品中去除基因組DNA等可(kě)能的DNA污染； 體(tǐ)外T7, T3, SP6等RNAPolymerases催化的RNA轉錄後去除DNA模闆；DNase I footprinting研究DNA-蛋白質相互作(zuò)用；缺口平移(nick translatioin)；産生(shēng)DNA随機片斷文庫；細胞凋亡TUNEL檢測中部分剪切基因組DNA作(zuò)為(wèi)陽性對照。
反應體(tǐ)系與條件：
1、在RNAse free管裏面加入以下成分
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RNA
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1μg (<8μl)
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10×DNase Buffer
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1μl
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DNase I
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1μl
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RNAse free water
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Up to 10μl
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2、37℃孵育30分鍾。
3、65℃孵育10分鍾，滅活DNase I。
4、取适量或者全部10μl的處理(lǐ)過的RNA直接用于反轉錄熒光定量PCR。
注意事項：
每μg RNA使用1 unit DNase I。如果RNA少(shǎo)于1μg，使用1 unit DNase I。如果使用RNA大(dà)于1μg，需要根據RNA的處理(lǐ)量按比例放大(dà)DNase I、10×DNase Buffer使用量和(hé)反應體(tǐ)積。
