RNA酶抑制(zhì)劑
RE135-01
2000U
-20 ℃保存,避免起泡,避免劇(jù)烈振蕩或攪拌
規格 價格
2000U ¥360

包裝量

目錄編号

包裝單位

RE135

2000 U

 

組成

   RE135-01

RNase Inhibitor  

50μl

 

 

産品儲存-20 ℃保存,避免起泡,避免劇(jù)烈振蕩或攪拌。

 

産品介紹:

本制(zhì)品是經過大(dà)腸杆菌表達的重組蛋白,與RNase A形成1:1複合體(tǐ),對RNase 表現高(gāo)度的非競争性抑制(zhì)(Ki=3×10-10 M)。該反應是可(kě)逆的,通(tōng)過尿素及疏基類試劑能夠解離複合體(tǐ),使RNase 複活而抑制(zhì)劑不可(kě)逆失活。本品屬蛋白質性質,與其它競争性抑制(zhì)劑(核酸類、無機磷酸類)不同,可(kě)以很(hěn)容易地通(tōng)過苯酚處理(lǐ)将其從反應體(tǐ)系中除去。

 

活性定義抑制(zhì)5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為(wèi)1個(gè)活性單位(U)。

第一鏈cDNA合成(以20 μl反應體(tǐ)系為(wèi)例)

 

1、加入

Components

Volume

Total RNA/mRNA

50 ng-5 μg/5-500 ng

Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)or

Random Primer(0.1 μg/μl) or

GSP(Gene Specific Primer)

1 μl

1 μl

2 pmol

dNTP Mixture (10 mM each)

1 μl

5× RT Buffer

4 μl

RNase Inhibitor(40 units/μl)

0.5-1 μl

TUREscript Hˉ RTase

1 μl

RNase free H2O to final volume

20 μl

 

2、輕輕混勻

如用Oligo(dT)18或基因特異引物(GSP),42℃孵育50min。

如用Random Primer,25℃孵育10 min,42℃孵育50 min。

3、70℃加熱5 min失活TUREscript Hˉ RTase。

 

RT-PCR

反轉錄所得(de)的cDNA可(kě)直接用于PCR反應或儲存于-20°C。