目錄号：RE139

産品介紹：

RNA性質不穩定，極易降解。溶解于無RNase 的TE 或水(shuǐ)中的純化RNA，即便是儲存于-20 ºC也難免降解。為(wèi)解決這一問題，可(kě)以将RNA 沉澱或RNA 溶液溶解于RNA 長期保存液中，可(kě)以允許RNA在4 ºC 過夜或-20 ºC 保存至少(shǎo)1 年而免于降解。RNA 長期保存液是RNA 樣品運輸和(hé)中長期保存的最佳選擇。需要時(shí)可(kě)用常規乙醇法沉澱回收RNA，或直接吸取儲存于RNA 溶解保護液中的高(gāo)濃度RNA(可(kě)達4 mg/ml)進行(xíng)RNA 電(diàn)泳、Northern Blot。

産品儲存：

4℃。

注意事項：

1、RNA長期保存液可(kě)能抑制(zhì)逆轉錄酶活性，做(zuò)RT-PCR反應前應該用乙醇沉澱RNA。

2、在RNA 長期保存液中的RNA 的終濃度不應該超過4μg /μl。

3、用RNA長期保存液溶解RNA沉澱：

4、對固體(tǐ)RNA 沉澱，每0.4-4μg RNA 沉澱加入1μl  RNA長期保存液，反複吹打混勻或者室溫振蕩15-30 分鍾溶解沉澱。幹燥的RNA沉澱難以溶解，可(kě)反複吹打混勻後50 ºC 加熱10-15 分鍾。最好先用小(xiǎo)體(tǐ)積無RNase 的TE 或水(shuǐ)溶解RNA 沉澱，然後按液态RNA 操作(zuò)。

5、對液态RNA 溶液，每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl  RNA 長期保存液，混勻。注意混合液中RNA 長期保存液的體(tǐ)積百分比不低(dī)于80%。

6、測定OD 值。注意加入相應量的RNA 長期保存液做(zuò)空(kōng)白。

7、将溶解的RNA 樣品儲存于-20 ºC或者-70 ºC。

從RNA長期保存液中沉澱RNA：

1、估計(jì)RNA 溶液終體(tǐ)積。加入4 倍體(tǐ)積的無水(shuǐ)乙醇，混勻。如果溶液體(tǐ)積過小(xiǎo)操作(zuò)不便，可(kě)加入RNase free water 稀釋RNA 溶液,如果溶液中RNA 含量低(dī)于0.25μg /μl，可(kě)加入5M NaCl(RNase free) 至終濃度0.2M,混勻，然後再加入4 倍體(tǐ)積乙醇。

2、室溫放置5 分鍾。

3、12,000 rpm 5 min。棄上(shàng)清。風幹，溶解。

4、重新沉澱的RNA溶解後可(kě)用于RT-PCR 反應。也可(kě)用于任何其他實驗。

直接使用RNA長期保存液中的RNA：

直接吸取RNA長期保存液中的RNA，進行(xíng)普通(tōng)或甲醛變性電(diàn)泳和(hé)Northern Blot。進行(xíng)甲醛變性電(diàn)泳時(shí)，最後上(shàng)樣的樣品中的RNA長期保存液的濃度可(kě)高(gāo)達50%。

附：甲醛變性電(diàn)泳樣品準備： 臨用前，混合水(shuǐ)（87μl），甲醛（81μl）, 50%甘油/含0.25 mg/ml溴芬蘭(48μl  ) 和(hé)20X MOPS (24 μl). 将上(shàng)述混合液和(hé)RNA長期保存液中的RNA樣品等體(tǐ)積混合，55 ºC溫育10分鍾，按照标準的甲醛變性電(diàn)泳過程上(shàng)樣。