概述
該介質的基質為(wèi)平均粒徑90μm的6%高(gāo)度交聯瓊脂糖,金屬離子螯合配基經共價連接具有(yǒu)良好的穩定性。 螯合配基帶有(yǒu)二價的Ni2+,是純化多(duō)數(shù)組氨酸标簽蛋白的介質。該介質的配基密度經過優化從而保證了高(gāo)蛋白結合載量和(hé)高(gāo)選擇性,而高(gāo)流速特性使得(de)該介質适合于大(dà)規模純化。
特點
① 相比三價金屬離子螯合劑亞氨基二乙酸制(zhì)成的Ni-IDA-瓊脂糖,Ni-NTA-瓊脂糖的非特異性吸附明(míng)顯減少(shǎo),可(kě)讓使用者獲得(de)更高(gāo)純度的目标蛋白;
② 支持變性包涵體(tǐ)蛋白的柱上(shàng)複性,起到分離、複性同步進行(xíng)的效果;
③ 可(kě)耐受一定濃度的還(hái)原試劑(β-巯基乙醇最高(gāo)可(kě)用到20 mM);
④ 瓊脂糖基質在pH 2~14範圍內(nèi)保持穩定,可(kě)耐受反複在位清洗(CIP);
⑤ 純化過程中極少(shǎo)的Ni2+滲漏;
⑥ 可(kě)以反複使用和(hé)再生(shēng)5~10次。
應用
用于各種表達來(lái)源(如大(dà)腸杆菌、酵母、昆蟲細胞和(hé) 哺乳動物細胞等)的組氨酸标簽蛋白的純化。