産品介紹:
本産品在推出無苯酚、氯仿RNA快速提取技(jì)術(shù)基礎上(shàng),又研發成功基因組DNA清除柱技(jì)術(shù)确保有(yǒu)效清除gDNA殘留,得(de)到的RNA不需要DNase消化,可(kě)直接用于PCR、熒光定量PCR等實驗。獨特的裂解液迅速裂解細胞和(hé)滅活細胞RNA酶,然後裂解混合物通(tōng)過一個(gè)基因組DNA清除柱,基因組DNA被清除而RNA穿透濾過。濾過的RNA用乙醇調節結合條件後,RNA在高(gāo)離序鹽狀态下選擇性吸附于離心柱內(nèi)矽基質膜, 再通(tōng)過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和(hé)漂洗液将細胞代謝物,蛋白等雜質去除, 最後低(dī)鹽的RNase free H20将純淨RNA從矽基質膜上(shàng)洗脫。
産品特點:
① 完全不使用有(yǒu)毒的苯酚,氯仿等試劑,也不需要乙醇沉澱等步驟。
② 快速,簡捷,單個(gè)樣品操作(zuò)一般可(kě)在30分鍾內(nèi)完成。
③ 獨家(jiā)研發成功基因組DNA清除柱技(jì)術(shù)确保有(yǒu)效清除gDNA殘留,得(de)到的RNA不需要DNase消化,可(kě)直接用于PCR、熒光定量PCR等實驗。
④ 多(duō)次柱漂洗确保高(gāo)純度,OD260/OD280典型的比值達2.1-2.2(100%純的RNA比值一般是2.2左右,很(hěn)多(duō)公司無法達到這個(gè)标準,所以1.9-2.0就可(kě)以用了,但(dàn)是我們的産品标準一般可(kě)以達到2.1-2.2),基本無DNA殘留,可(kě)用于RT-PCR,Northern-blot和(hé)各種實驗。
注意事項:
- 所有(yǒu)的離心步驟均在室溫完成,使用轉速可(kě)以達到13,000 rpm的傳統台式離心機。
- 樣品處理(lǐ)量絕對不要超過基因組吸附柱DA和(hé)和(hé)RNA吸附柱RA處理(lǐ)能力,否則造成DNA殘留或者産量降低(dī)。不同組織細胞種類RNA/DNA相差極大(dà),例如胸腺脾髒DNA含量豐富,超過5mg就會(huì)超過柱子處理(lǐ)能力。COS細胞RNA含量豐富,超過3x106細胞就會(huì)超過柱子吸附能力。所以開(kāi)始摸索實驗條件時(shí),如果不清楚樣品DNA/RNA含量時(shí)甯可(kě)使用較少(shǎo)的樣品處理(lǐ)量,如細胞不超過3-4x106,組織不超過10mg。将來(lái)根據樣品試驗情況增加或者減少(shǎo)處理(lǐ)量。
- 裂解液LBT Plus 和(hé)去蛋白液PRS中含有(yǒu)刺激性化合物,操作(zuò)時(shí)要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和(hé)衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí),要用大(dà)量清水(shuǐ)或者生(shēng)理(lǐ)鹽水(shuǐ)沖洗。