目錄号:RE137
目錄編号
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包裝單位
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RE137-01
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1ml
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RE137-02
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5ml
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産品介紹:
乙醇低(dī)溫沉澱是回收液體(tǐ)樣品中的DNA和(hé)RNA的最常用方法。然而乙醇沉澱并不能完全回收樣品中的核酸,至少(shǎo)丢失30%左右的核酸。如果液體(tǐ)樣品中的核酸濃度很(hěn)低(dī)或DNA<200bp,乙醇沉澱隻能回收50%的DNA和(hé)RNA。Poly Carrier是一種分子生(shēng)物學級Poly多(duō)聚物溶液,在乙醇沉澱時(shí)加入5-10μl Poly Carrier即可(kě)明(míng)顯提高(gāo)核酸沉澱的得(de)率,更可(kě)使痕量DNA的回收率達到95~98%,同時(shí)可(kě)選擇性去除短(duǎn)引物(<22bp)片段和(hé)dNTP,用于沉澱回收标記探針,去除未标記dNTP。與生(shēng)物源性的核酸沉澱助劑如糖原和(hé)tRNA相比,Poly Carrier本身絕無核酸污染也無DNA酶和(hé)RNA酶活性,同時(shí)不影(yǐng)響酶切、連接、轉錄、PCR、轉化轉染等,也不影(yǐng)響核酸電(diàn)泳和(hé)DNA-蛋白相互作(zuò)用。Poly Carrier已成為(wèi)最常用的核酸助沉劑。
産品儲存:
室溫或者4℃保存一年,-20℃保存時(shí)間(jiān)更長。
産品特點:
1、明(míng)顯提高(gāo)DNA或RNA沉澱的得(de)率。
2、痕量DNA和(hé)RNA(20pg)回收達95~98%。
3、不影(yǐng)響酶切、連接、轉錄、PCR等反應。
4、不影(yǐng)響電(diàn)泳和(hé)DNA-蛋白相互作(zuò)用。
使用方法:
1、提高(gāo)DNA或RNA沉澱回收效率的使用方法:
- ① 在1ml RNA或者DNA溶液中加入4-8 µl Poly Carrier ,颠倒混勻。
- ② 按照标準的乙醇沉澱法來(lái)沉澱RNA或者DNA,如加入3M PH5.2醋酸鈉溶液(沉澱RNA時(shí)應該使用無RNA酶處理(lǐ)的溶液)到終濃度0.3摩爾(約1/10體(tǐ)積),然後加入2倍體(tǐ)積的無水(shuǐ)乙醇,混勻後室溫或者冰箱放置10-30分鍾,12000轉離心10分鍾,棄上(shàng)清,70%乙醇漂洗一遍,去上(shàng)清,晾幹沉澱,将沉澱重新溶解于适量DEPC處理(lǐ)水(shuǐ)(RNA沉澱)或者其它如TE緩沖液中。
2、提高(gāo)DNA或RNA産率的使用方法:
每一毫升總RNA提取試劑TRIpure(TRIzol)或者DNA提取試劑DNAzol加入4-8 µl Poly Carrier,然後繼續按照這些(xiē)産品的說明(míng)書(shū)進行(xíng)後續步驟。
注意事項:
Poly Carrier 會(huì)增加RNA或者DNA的光密度值,因此測量光密度值的時(shí)候,為(wèi)了消除Poly Carrier影(yǐng)響 ,應該按照同樣的實驗過程做(zuò)一個(gè)空(kōng)白對照樣品(使用同樣的試劑和(hé)Poly Carrier ,但(dàn)是不含有(yǒu)RNA或者DNA樣品,将最後的Poly Carrier沉澱溶解在和(hé)樣品一樣的溶解液中)。測量樣品和(hé)空(kōng)白對照在260 和(hé)280 nm 的光密度值。将樣品的光密度值減去空(kōng)白對照的光密度值,便可(kě)以得(de)到實際的樣品的光密度值。如果定量不需要很(hěn)精确,也可(kě)以估測。